ACE-031 1mg/fiala neutralizza la miostatina e attiva il potenziale di crescita muscolare

Introduzione al nucleo di ACE-031 1mg/fiala

Proteina di fusione del recettore IIB dell'attivina|Regolatore della crescita muscolare 1 mg/flacone

Nome generico: ACE-031 (ActRIIB-Fc)

Nome inglese: ACE-031

Struttura delle proteine: Una proteina di fusione ricombinante, formata dalla fusione del dominio extracellulare del recettore dell'attivina IIB e di un frammento Fc IgG1 umano.

Peso molecolare: Circa 100-120 kDa (dopo glicosilazione)

Purezza: maggiore o uguale al 90% (SDS-PAGE/HPLC)

Contenuto: 1 mg/flacone

Aspetto: polvere liofilizzata bianca o biancastra-

Magazzinaggio: Congelare a -80 gradi, proteggere dalla luce e conservare in un luogo asciutto.

Guida all'uso e alla conservazione

ACE-031 (proteina di fusione del recettore dell'attivina IIB-Fc):

ACE-031 è una proteina di fusione ricombinante formata fondendo il dominio di legame del ligando extracellulare-del recettore dell'attivina IIB con il frammento Fc dell'immunoglobulina umana G1 (IgG1). Come recettore esca solubile, si lega con elevata affinità e neutralizza i regolatori negativi della crescita muscolare (come miostatina/GDF-8, attivina, ecc.), bloccando così le loro vie di segnalazione a valle. Nei modelli sperimentali, questo effetto bloccante porta ad un aumento significativo della massa muscolare scheletrica. A differenza dell'iniezione diretta di fattori di crescita, ACE-031 esercita i suoi effetti alleviando i segnali endogeni che inibiscono la crescita, fornendo un potente strumento per studiare i meccanismi molecolari dell'ipertrofia muscolare, delle malattie dell'atrofia muscolare (come la distrofia muscolare di Duchenne e la cachessia) e del metabolismo muscolare.

Grazie al suo meccanismo unico di promozione della crescita muscolare alleviando i segnali inibitori endogeni, ACE-031 ha attirato un'attenzione significativa da parte di ricercatori nel campo della biologia muscolare, delle malattie neuromuscolari, della cachessia (come la cachessia tumorale e la sarcopenia) e della medicina rigenerativa. Rispetto agli steroidi anabolizzanti tradizionali, il suo meccanismo basato sull'-interazione proteica- può offrire un diverso spettro d'azione, rendendolo un importante strumento di ricerca per studiare la precisa regolazione dell'omeostasi muscolare, valutare nuove terapie anti-atrofia muscolare ed esplorare modelli animali di interazioni muscolari con altri organi (come ossa e grasso).

Applicazioni ACE-031:

Come recettore esca solubile, viene utilizzato in modelli in vitro e in vivo per legarsi con elevata affinità e neutralizzare i membri della superfamiglia TGF- come la miostatina (GDF-8) e l'attivina, studiando così gli effetti del blocco di questa via di segnalazione sulla differenziazione dei mioblasti, sulla massa e sulla funzione dei muscoli scheletrici e sul metabolismo sistemico. Viene utilizzato principalmente per esplorare le strategie di trattamento per le malattie dell'atrofia muscolare, la riparazione rigenerativa dopo lesioni muscolari e la relazione tra muscolo e metabolismo energetico.

È ampiamente utilizzato nei modelli animali della distrofia muscolare di Duchenne, nei modelli di cachessia tumorale, negli studi sulla sarcopenia-correlata all'età e nell'esplorazione dei meccanismi di rigenerazione e ipertrofia muscolare. La sua forma proteica ricombinante standardizzata fornisce un reagente sperimentale chiave per valutare il potenziale terapeutico di prendere di mira la via di segnalazione ActRIIB e comprendere la rete di regolamentazione della crescita muscolare in condizioni sperimentali rigorosamente controllate.

Metodi di utilizzo e conservazione

1. Ricostituzione e preparazione:

Solvente consigliato:

Solvente preferito: acqua sterile per preparazioni iniettabiliOsoluzione salina sterile tamponata con fosfato (PBS) a pH 6,0-7,2. I solventi acidi sono severamente vietati.

Porta chiavi: Si consiglia vivamente di aggiungere una proteina trasportatricealla ricostituzione e a tutte le soluzioni di diluizione.PBS sterile contenente 0,1%-1% di albumina sierica bovina (BSA) o 0,1% HSAè raccomandato per prevenire l'adsorbimento e l'aggregazione delle proteine.

Diluizione della soluzione di lavoro: Diluire conPBS sterile contenente proteine ​​trasportatrici.

Assolutamente vietato: È severamente vietato utilizzare acqua distillata, acqua deionizzata o soluzioni tampone prive di proteine-per preparare direttamente soluzioni madre ad alta-concentrazione. Evitare il vortex, lo scuotimento violento o il soffiaggio e l'agitazione ripetuti.

Procedura di preparazione standard:

Preparazione del solvente:

Utilizzare PBS (pH 7,0-7,2) filtrato sterile attraverso una membrana filtrante da 0,22 μm o acqua sterile per preparazioni iniettabili.

Si consiglia di aggiungere BSA o HSA al solvente ad una concentrazione finale dello 0,1%-1%.

Pre-raffreddare il solvente su ghiaccio o utilizzare solvente fresco a temperatura ambiente.

Procedura di ricostituzione:

Eseguire la procedura in un ambiente pulito. Aggiungere 1,0 ml del solvente consigliato a una fiala da 1 mg.

Consentire il solventescorrere lentamente lungo la parete della bottiglia, ed evitare assolutamenteimpatto diretto sulla torta-liofilizzata.

Posizionare la fiala su un tavolo einclinarlo e ruotarlo molto lentamenteper consentire al solvente di assorbire tutta la polvere. Lasciare riposare per 10-15 minuti affinché si dissolva naturalmente.

Non vortexare, vibrare o agitare violentemente.Capovolgere delicatamente per mescolare.

Concentrazione finale: 1 mg/mL (circa 8-12 μM, a seconda del grado di glicosilazione) soluzione madre.

Erogazione e diluizione:

Erogare immediatamente in dosi singole da 5-20 μL utilizzando provette da centrifuga a basso assorbimento (come provette silanizzate).

Se è necessaria la diluizione, eseguire diluizioni seriali utilizzando PBS contenente la proteina trasportatrice. Evita diluizioni-su larga scala in un unico passaggio.

Etichettato chiaramente: ACE-031, concentrazione, data di preparazione, numero di lotto, temperatura di conservazione.

Riferimento della concentrazione di lavoro:

Esperimenti cellulari in vitro: L'intervallo di concentrazione comunemente utilizzato è compreso tra 1 e 20 ug/mL (circa tra 10 e 200 nM), che deve essere ottimizzato in base al tipo di cellula e allo scopo sperimentale.

Esperimenti in vivo sugli animali: Il dosaggio deve essere rigorosamente determinato in base alla letteratura sui modelli animali pubblicata. Le vie di somministrazione comuni sono l'iniezione sottocutanea o intraperitoneale, con dosaggi tipicamente nell'intervallo mg/kg.Gli esperimenti preliminari sono obbligatori.

Esempio di calcolo: Per preparare una soluzione di lavoro da 10 ug/mL, prendere 10 μL della soluzione madre da 1 mg/mL e aggiungerla a 990 μL di PBS contenente 0,1% BSA.

Punti chiave da notare:

Maneggiare con cura: La manipolazione deve essere estremamente delicataper evitare la creazione di schiuma, bolle o forze di taglio che potrebbero denaturare la proteina.

Proteina trasportatrice: È essenziale ricostituire e diluire ilproteina utilizzando una soluzione contenente la proteina trasportatrice, poiché ciò è fondamentale per evitare che la proteina venga assorbita sulla superficie del contenitore e si aggreghi.

Ricostituzione lenta: Lasciare sciogliere la polvere liofilizzata lentamente e in modo naturalenel solvente; se necessario, il tempo di riposo può essere prolungato.

Ciclo di congelamento-scongelamento severamente vietato: Sono severamente vietati cicli ripetuti di congelamento-scongelamento; la soluzione deve essere dispensata in una sola volta. La soluzione di lavoro diluita deve essere utilizzata il più presto possibile.

Osservare la condizione: Dopo la ricostituzione, la soluzione deve essere limpida, incolore o giallo pallido e leggermente viscosa. La presenza di torbidità, materiale flocculante o particelle indica che la proteina potrebbe essersi aggregata e la sua utilizzabilità deve essere attentamente valutata.

2. Condizioni di conservazione:

Polvere liofilizzata non ricostituita:

Archiviazione-a lungo termine: Congelare a -80 gradi. Non conservare a -20 gradi.

Durata di conservazione: A -80 gradi, il periodo di conservazione consigliato è di 12 mesi.

Proteggere rigorosamente dalla luce: conservare nell'originale sacchetto di alluminio-a prova di luce con un essiccante all'interno.

Soluzione ricostituita:

Erogazione immediata:Dovrebbe essere effettuata la somministrazionesubito in ghiacciodopo la ricostituzione.

Riconfezionamento e congelamento: Dopo il riconfezionamento,conservare a -80 gradiper un massimo di 1 mese. L'archiviazione-a lungo termine non è consigliata.

Soluzione funzionante: Soluzione di lavoro diluitanon deve essere memorizzato. Dovrebbe essere conservato nel ghiaccio e consumato lo stesso giorno.

Condizioni di trasporto:

Deve essere trasportatoSottoghiaccio secco(-78 gradi) condizioni.

L'imballaggio deve garantire che il prodotto rimanga congelato durante l'intero processo.

3. Stabilità e standard di lavorazione:

Stabilità fisico-chimica:

Stabile in soluzioni tampone a pH quasi neutro (6,0–7,5). Evitare valori di pH estremi.

È estremamente sensibileallo stress meccanico (vortici, oscillazioni, bolle) e ai ripetuti cicli di congelamento-disgelo .

È sensibile all'adsorbimento superficiale, quindi è necessario utilizzare una proteina trasportatrice e un contenitore a basso-adsorbimento.

Mantenimento della bioattività:

Seguire i principi di"manipolazione delicata, protezione del trasportatore, ricostituzione lenta, congelamento profondo e divieto rigoroso di congelamento e scongelamento".

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